一、產(chǎn)品簡介
1. 檢測原理
Cell Counting Kit-8 (CCK-8) 細(xì)胞活性檢測試劑盒是一種廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性相關(guān)實驗的快速、高靈敏度檢測試劑盒。 CCK-8 的主要成分為水溶性四唑鹽[Water Soluble Tetrazolium-8] (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽),Water Soluble Tetrazolium-8 是一種類似于 MTT 的化合物,在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成橙黃色的水溶性的甲臜(Formazan,參考圖 1)。
Water Soluble Tetrazolium-8 被細(xì)胞內(nèi)脫氫酶生物還原后生成的甲臜能夠直接溶解在培養(yǎng)基中?;罴?xì)胞的數(shù)目越多,則顏色越深。對于同樣的細(xì)胞,顏色的深淺和細(xì)胞數(shù)目呈線性關(guān)系。

圖 1. Water Soluble Tetrazolium-8 分子結(jié)構(gòu)及 CCK-8 檢測原理
2. 產(chǎn)品特點
1. 本試劑盒提供了一種靈敏度高、操作簡便、使用安全的細(xì)胞增殖與活性檢測方法。與傳統(tǒng)的 MTT 法相比具有明顯的優(yōu)勢:
MTT 法生成的甲臜不是水溶性的,需要使用 DMSO 等有機(jī)溶劑溶解;而 CCK-8 產(chǎn)生的甲臜是水溶性的,省去了溶解步驟,因此減少了該操作步驟帶來的實驗誤差。
2. 由于 CCK-8 產(chǎn)生的甲臜是水溶性的,無需吸掉培養(yǎng)基后,再用 DMSO 等有機(jī)溶劑溶解,非常適合用于懸浮細(xì)胞的活性測定。
3. 與 MTT 方法相比,CCK-8 法線性范圍更寬,靈敏度更高。
4. CCK-8 法對細(xì)胞無毒性,可以多次測定,選取最佳測定時間。
5. CCK-8 法無需配制,即開即用。
6. CCK-8 法適合大規(guī)模、高通量的樣品檢測。